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圓二色譜分析動態(tài)超高壓微射流均質(zhì)處理后卵清蛋白二級結構的變化
  • 發(fā)布時間 : 2018-05-16 15:22:51
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圓二色光譜是目前應用最為廣泛的測定蛋白質(zhì)二級結構的方法,是研究稀溶液中蛋白質(zhì)構象的一種快速、簡單、較準確的方法。它可以在溶液狀態(tài)下進行測定,較接近其生理狀態(tài)。而且測定方法快速簡便,對構象變化靈敏,所以它是目前研究蛋白質(zhì)二級結構的主要手段之一,并已廣泛應用于蛋白質(zhì)的構象研究中。

蛋白質(zhì)是由氨基酸通過膚鍵連接而成的具有特定結構的生物大分子。在蛋白質(zhì)中,氨基酸的a一碳原子是不對稱碳原子,具有光學活性,蛋白質(zhì)的膚鏈走向也是不對稱的結構,也具有光學活性,當平面圓偏振光通過這些光活性的生色基團時,光活性中心對平面圓偏振光中的左、右圓偏振光的吸收不相同,產(chǎn)生了吸收差值,由于這種吸收差的存在,造成了偏振光矢量的振幅差,圓偏振光變成了橢圓偏振光,這就是蛋白質(zhì)的圓二色性。通過測定蛋白質(zhì)溶液的圓二色性,可以研究蛋白質(zhì)的二級結構及其變化信息。一般蛋白質(zhì)的圓二色光譜分為兩段,波長范圍在185一245Inn稱為遠紫外區(qū),245一320nln稱近紫外區(qū)。具有不同二級結構的蛋白質(zhì)或多膚所產(chǎn)生的CD譜帶的位置、吸收的強弱都不相同。a一螺旋結構在靠近192Inn有一正的譜帶,在222和208nm處表現(xiàn)出兩個負的特征肩峰譜帶;p一折疊的CD譜在216nm有一負譜帶,在185一Zoonln有一正譜帶;p一轉(zhuǎn)角在206lun附近有一正CD譜帶。遠紫外區(qū)是蛋白質(zhì)膚鏈的吸收峰,反映了主鏈的構象。因此,可利用這一區(qū)域的CD光譜推算蛋白質(zhì)分子中的a一螺旋、p一折疊、p一轉(zhuǎn)角以及無規(guī)卷曲的含量。

因此,可以利用圓二色光譜分析經(jīng)動態(tài)超高壓微射流均質(zhì)處理后的卵清蛋白的二級結構變化情況。

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